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種子TTC染色液的正確使用方法
更新時間:2022-11-23 點擊次數:1988次種子TTC染色液的正確使用方法
TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑),是一種脂溶性光敏感復合物,可用于檢測種子的生存能力,或檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。其基本原理在于,TTC是呼吸鏈中吡啶——核苷結構酶系統的質子受體,能與正常組織中的脫氫酶反應生成不溶于水的紅色三苯基甲臜(TTF)化合物。正常組織和有活力的種子中富含脫氫酶,可與TTC反應呈現紅色,如果組織缺血梗塞死亡或種子生活力衰退,則不能與TTC反應,組織不能著色或染色很淺。據此可根據染色部位和深淺判定組織缺血梗塞程度或種子活力。
本產品TTC染液中TTC濃度為0.1%,適用于植物種子活力的染色。經染色后,有活力的種子呈紅色,無生命力的種子呈白色或黃色。
操作步驟
樣本前處理:種子放入水中30-35℃浸泡2-6 h或更長時間,使其充分吸脹。
染色步驟
1. TTC染液經37℃預熱30 min。
2. 種子剝離外殼或種皮,縱切均分成兩瓣,放入潔凈的離心管中。加入TTC染色(種子)浸沒樣本,37℃水浴鍋避光染色30-60 min,期間每隔15 min觀察種子著色情況。
3. 當種子出現紅色且不再變深時即可倒出染液,向容器內緩慢加入固定液(推薦G1101)浸沒組織終止染色反應。樣本需避光保存。
4. 拍照前取出組織,用濾紙吸干固定液,根據需要用照相機拍照。
注意事項
1. 染色后的樣本易褪色,需盡快拍照。
2. 為了您的安全和健康,操作時請穿實驗服并佩戴一次性手套。
種子TTC染色液的正確使用方法