超好用的豬流行性乙型腦炎病毒IgG抗體PPA-ELISA檢測試劑盒
更新時間：2020-07-29 點擊次數(shù)：1193次超好用的豬流行性乙型腦炎病毒IgG抗體PPA-ELISA檢測試劑盒
信帆生物供應(yīng)豬流行性乙型腦炎病毒IgG抗體PPA-ELISA檢測試劑盒，產(chǎn)品可用于科研實驗，獸醫(yī)診斷等，質(zhì)量穩(wěn)定，深受各大高校，農(nóng)科院，中科院青睞！
【產(chǎn)品簡介】豬流行性乙型腦炎（JE）是一種以中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生病變的急性傳染病，也是一種人畜共患的自然疫源性疾病，給國內(nèi)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的損失。在豬流行性乙型腦炎的免疫預(yù)防工作中，接種了豬流行性乙型腦炎疫苗后，由于多種因素可能導(dǎo)致豬不產(chǎn)生或產(chǎn)生低水平豬流行性乙型腦炎病毒抗體。
E蛋白是JEV病毒粒子表面主要的結(jié)構(gòu)蛋白，其表面的抗原決定簇具有血凝活性和中和活性，能刺激機體產(chǎn)生血凝抑制抗體、補體結(jié)合抗體、中和抗體，引起宿主產(chǎn)生保護性的免疫應(yīng)答。本試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測豬血清中抗JEV E蛋白抗體IgG，用于免疫豬流行性乙型腦炎疫苗后的抗體動態(tài)水平監(jiān)測，指導(dǎo)免疫預(yù)防工作，評估豬場豬流行性乙型腦炎免疫狀況，也可用于豬流行性乙型腦炎的流行病學(xué)調(diào)查。
【產(chǎn)品內(nèi)容】
| 試劑盒主要成分 | 數(shù) 量 |
| 包被板 | 96T×2 |
| 陽性對照 | 1ml×1 |
| 陰性對照 | 1ml×1 |
| 酶標(biāo)結(jié)合物 | 20ml×1 |
| 樣品稀釋液 | 50ml×1 |
| 底物液 | 20ml×1 |
| 終止液 | 15ml×1 |
| 20×濃縮洗滌液 | 50ml×1 |
| 封口膠 | 2份 |
| 說明書 | 1份 |
【成分性狀】
| 包被板 | 96孔塑制微孔板，無色透明，干燥，無雜質(zhì)吸附 |
| 酶標(biāo)結(jié)合物 | 略帶黃色澄明液體 |
| 陰、陽性對照 | 略帶黃色澄明液體 |
| 樣品稀釋液 | 無色或略帶黃色澄明液體 |
| 濃縮洗滌液 | 無色或略帶黃色澄明液體 |
| 底物液 | 無色或微藍(lán)色澄明液體 |
| 終止液 | 無色澄明液體，低溫條件下可能會出現(xiàn)絮狀沉淀 |
【用法與判定】 按以下步驟進行：
1、需要自備的器材
1.1 微量移液器；
1.2 微量移液器配套使用的槍頭；
1.3 用來稀釋洗滌液的500 ml量筒；
1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標(biāo)儀；
1.5 用于稀釋樣品的1.5 ml Ep管；
1.6 蒸餾水或去離子水。
2、樣品的制備
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進行100倍稀釋(建議：2μl血清樣品加入198μl樣品稀釋液中)，樣品加入抗原包被板前要充分混勻，稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。
注意：①制備血清用的血液樣本應(yīng)無溶血現(xiàn)象發(fā)生；②不能稀釋陰性、陽性對照。
3、操作步驟 （﹡使用前應(yīng)輕輕旋轉(zhuǎn)或震蕩予以混勻，所有試劑應(yīng)平衡至室溫）
3.1 在A1和A2孔中分別加入100μl陰性對照；
3.2 在A3和A4孔中分別加入100μl陽性對照；
3.3 取100μl經(jīng)1:100稀釋好的待檢樣品加入相應(yīng)孔中，并做好記錄；
3.4 37℃孵育1h；
3.5 將各孔的液體棄入廢液桶，每孔加250μl的洗滌液（試劑盒內(nèi)20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結(jié)晶，需先溶解后，方可進行稀釋）進行洗板，重復(fù)5次，每次30s；
﹡加液時防止各孔間洗滌液串流影響檢測結(jié)果，盡量將孔內(nèi)洗滌液拋甩干凈；
3.6 每孔加100μl酶標(biāo)結(jié)合物；
3.7 37℃孵育1h；重復(fù)步驟3.5；
3.8 每孔加100μl底物液；
3.9 37℃孵育10min（避光顯色）；
3.10 每孔加100μl的終止液；
3.11 立刻于450nm波長處測定各孔的吸光度值，即OD450值。
4、試驗有效性判斷
4.1陰性對照：正常情況下，陰性對照OD450值≤0.2；
4.2陽性對照：正常情況下，陽性對照OD450值≥0.4；
4.3臨界值(C.O.)的計算：臨界值=0.17+陰性對照均值；陰性對照OD450值大于0.2時應(yīng)舍棄，如所有陰性對照OD450值都大于0.2時須重復(fù)實驗；陰性對照于0.05時以0.05計算。
4.4結(jié)果判定：檢測樣品OD450值≥臨界值判定該檢測樣品為陽性；檢測樣品OD450值＜臨界值判定該檢測樣品為陰性。
【注意事項】
（1）待檢血清樣品數(shù)量過多時，應(yīng)先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后，再統(tǒng)一將血清樣品加入酶標(biāo)板中，使反應(yīng)時間一致。
（2）試劑盒使用的過程中不要吸煙、喝水和吃東西。
（3）底物液和終止液對皮膚有刺激性，注意防護。
（4）底物液不要暴露于強光和任何氧化劑；使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。
（5）所有試劑應(yīng)在2～8℃存放；使用前恢復(fù)到室溫，使用后放回2～8℃。
（6）注意防止試劑盒組分受到污染。
（7）不要使用超過有效期的試劑，不同批次試劑盒的組分不要混用。
（8）操作過程中的移液、時間和洗滌必須精確。
【規(guī)格與包裝】96T×2
【貯藏與有效期】2～8℃避光保存，有效期為12個月
超好用的豬流行性乙型腦炎病毒IgG抗體PPA-ELISA檢測試劑盒
